腎移植的急性排異（AR）增大了移植腎慢性損傷和衰竭的風(fēng)險，所以急需無(wú)創(chuàng )分子測定來(lái)改進(jìn)疾病診斷和病人監護。

    BioMark HD和EP1平臺擁有數字陣列集成流控電路，可實(shí)現定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應盡管用了免疫抑制療法，大約15%到20%的腎移植患者仍會(huì )發(fā)生急性排異，血清肌酐是腎功能的標記物，它水平的升高往往預示著(zhù)排異，然后進(jìn)行腎活組織檢查，確認是否發(fā)生了排異。

    美國加利福尼亞大學(xué)舊金山分校的科學(xué)家與來(lái)自多國的科學(xué)家合作，在2005年至2012年間收集了美國、墨西哥和西班牙的八座腎移植中心438名成人和兒童腎移植患者的558份外周血樣本，以開(kāi)發(fā)定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應（qPCR）檢驗產(chǎn)品。他們用急性排異或無(wú)急性排異（由腎活組織檢查確定）成人的143份樣本開(kāi)發(fā)了這種檢驗產(chǎn)品，然后用三組患者完成并確證該檢驗產(chǎn)品。

    用基于柱方法的試劑盒提取總核糖核酸（RNA），在安捷倫科技公司（Santa Clara, CA, USA）的2100生物分析儀上用RNA 6000納米芯片實(shí)驗室試劑盒測量RNA完整度。在96.96動(dòng)態(tài)陣列和芯片上執行微流控qPCR,通過(guò)HX IFC控制器預先加載該芯片并在Fluidigm公司（South San Francisco, CA, USA）的BioMark qPCR平臺上執行qPCR.

    科研小組評估了43個(gè)基因中10個(gè)基因的差異表達，選擇已確證的同樣10個(gè)基因作為標記物，用標準化的臨床實(shí)驗樣本收集和處理程序診斷外周血中急性排異的。為了提高143份成人樣本的急性排異診斷準確度，用多種統計建模方法又找到7個(gè)基因，提高了基因組合鑒別急性排異與非急性排異樣本的準確度，所以最終的選擇是17個(gè)基因。該測定名為kSORT,能區分急性排異風(fēng)險高和風(fēng)險低的患者。無(wú)論任何年齡、移植后經(jīng)過(guò)的時(shí)間以及樣本源，kSORT測定都能夠檢測血液中的急性排異，無(wú)需額外的數據歸一化。

    該研究的論文發(fā)表于2014年11月11日的《公共科學(xué)圖書(shū)館》雜志《醫學(xué)》分冊上。作者總結說(shuō)，kSORT測定是一種簡(jiǎn)單、穩定、可用于臨床的血液檢驗。他們正在用 kSORT進(jìn)行一項前瞻性觀(guān)察實(shí)驗以及另一項前瞻性隨機雙盲臨床干預實(shí)驗，以確定移植后如何繼續應用kSORT,輔助現有的臨床規程指南分類(lèi)病人的免疫風(fēng)險、藥物載荷和活檢要求。