【PPT】【專(zhuān)家講座】血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸檢測技術(shù) - 醫學(xué)資源下載
資源作者：hehelili
資源分類(lèi)：醫學(xué) - 功能檢查科
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上傳日期：2013-07-30 14:09:38

血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸檢測技術(shù)及應用 浙江省血液中心 朱發(fā)明 2010-04 提綱 輸血風(fēng)險 血液NAT篩查 必要性 NAT篩查現狀 現有技術(shù) 實(shí)時(shí)熒光PCR 轉錄介導擴增技術(shù) 國內數據情況 實(shí)施過(guò)程中的要點(diǎn) 結果分析解釋要點(diǎn) 進(jìn)展與動(dòng)態(tài) 輸血風(fēng)險 輸血不良反應的比例 殘留風(fēng)險的來(lái)源 感染窗口期 90%以上 現有試劑未檢測病毒變異 (種屬,亞型) 感染后免疫沉默攜帶者（抗體陰性） 持續病毒感染但血清學(xué)陰性 比較罕見(jiàn) HCV事例 2 例標本HCV RNA陽(yáng)性，6個(gè)月后HCV抗體陰性(120萬(wàn)檢測標本) 錯誤 (人為錯誤） 0.05% 確認陽(yáng)性人為偏差為陰性 (Busch et al. Trans. 2000) 核酸檢測的必要性和可行性 存在殘留風(fēng)險 數據未知 窗口期事件 90%以上 ELISA檢測技術(shù)不足 **要求 社會(huì )期望 行業(yè)需求 核酸技術(shù)日趨成熟 經(jīng)濟的發(fā)展 關(guān)注輸血傳播性疾病 HBV 早期感染標志物 HCV 早期感染標志物 HIV-1流行 HIV 早期感染標志物 NAT檢測的現狀 國際上 1990s’歐洲開(kāi)始對血液制品進(jìn)行核酸檢測（HIV,HCV） 1996年美國開(kāi)始評估NAT技術(shù)在血站的應用 中國香港，新加坡，馬來(lái)西亞，印尼等周邊國家采用NAT技術(shù) 檢測（單檢、混樣） 國內情況 血站早期研究數據 部分血站進(jìn)行NAT檢測 血站大規模試點(diǎn) 血制品要求進(jìn)行篩選（pool） NAT技術(shù) 病原體核酸檢測技術(shù)(nucleic acid testing)是直接檢測病原體核酸的一系列技術(shù)的總稱(chēng) NAT敏感性高 檢測核酸 大大縮短“窗口期” 可使輸血傳播疾病的危險性降低 NAT檢測的技術(shù)方法 在PCR的基礎上衍生 PCR技術(shù) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR TMA(轉錄介導的擴增系統) 其他：NASBA, bDNA 大樣本量血液篩查的擴增技術(shù) PCR技術(shù) TMA技術(shù)(轉錄介導的擴增系統(transc**tion mediated amplification) 不同的技術(shù)平臺： PCR技術(shù) PCR技術(shù) 衍生的技術(shù) RT-PCR 巢式PCR 多重PCR PCR-SSP 不對稱(chēng)PCR 熒光定量PCR TaqMan探針?lè )? TaqMan作用原理 轉錄介導的擴增方法 (TMA) 轉錄介導的擴增系統(transc**tion mediated amplification,TMA) 諾華診斷 鼠白血病病毒逆轉錄酶和T7 RNA多聚酶 在等溫條件下來(lái)擴增RNA或DNA的反應系統 核酸序列依賴(lài)擴增系統(nucleic acidｓsequence based amplification,　NASBA) 荷蘭產(chǎn)品 原理類(lèi)似TMA 靶標擴增 NAT檢測數據及其效果 NAT提高血液安全水平 國內數據 上海血液中心 美國Chiron Procleix HIV-1/HCV 8人份（36800） 24 人份混合（66739）； HCV NAT+: 0／103539 HIV NAT+: 0／103539 ELISA為進(jìn)口試劑、國產(chǎn) 中國輸血雜志，2003，16（3）：157-160

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